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小麦粉中过氧化苯甲酰使用量检测方法
DB35/T122－2001
1 范围
本标准规定了小麦粉中过氧化苯甲酰使用量的原理、试剂、仪器和设备、样品检测方法。
2 试验方法
2.1 气相色谱法
2.1.1 原理
样品中过氧化苯甲酰用乙醚提取，然后还原成苯甲酸，进气相色谱仪分离、测定，由峰高在标准曲线上求检测液中过氧化苯甲酰浓度。再根据计算公式计算样品中过氧化苯甲酰含量。
2.1.2 试剂
2.1.2.1 碘化钾溶液：500g/1
2.1.2.2 柠檬酸甲醇溶液：100g/1
2.1.2.3 硫代硫酸钠溶液：100g/1
2.1.2.4 饱和氯化钠溶液
2.1.2.5 硫酸溶液：(1：9)
2.1.2.6 乙醚(不含过氧化物)
2.1.2.7 氯化钠
2.1.2.8 丙酮
2.1.2.9 甲醇
2.1.3 仪器和条件
2.1.3.1 气相色谱仪，附FID检测器
2.1.3.2 色谱柱：2m×3mm玻璃柱，内为0.216mm～0.172mm
chromosorbW.AW担体，涂以5％＋1％DEGS＋磷酸
2.1.3.3 测定条件
柱温170℃；
进样口温度230℃；
检测器温度220℃；
载气流量可根据不同仪器特点作适当调整，以期获得最佳效果。
2.1.4 样品的预处理
2.1.4.1 试样预处理
a)称取约10g(准确至0.01g)小麦粉置于100ml具塞试管中加20ml～25ml饱和氯化钠溶液振摇，使其均匀湿润，用30ml和20ml乙醚分别提取，用乙醚湿润的滤纸将提取液过滤于抽提瓶中，并在40℃水浴中浓缩至约5ml。
b)依次加入丙酮30ml、甲醇20ml、柠檬酸甲醇液1ml、碘化钾液2ml，不时振摇，于室温下放置10min，在60℃水浴中浓缩至10ml，用40ml水转至250ml分液漏斗中，加2ml硫代硫酸钠溶液振摇，加硫酸溶液5ml，加氯化钠振摇使之饱和。
c)在上述饱和溶液中加50ml乙醚提取，水层转至另一250ml分液漏斗中，水层再加50ml乙醚洗涤一次，合并乙醚层，醚层中加10g无水硫酸钠脱水，过滤，在40℃水浴中挥干。
d)在挥干试样中准确加入5.0ml丙酮供色谱用。
2.1.4.2 标准液制备
准确称取纯品过氧化苯甲酰100mg(精确至0.1mg)加少量丙酮溶解，转至100ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，摇匀。取此液10.0ml转至另一100ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，摇匀，此液每毫升含过氧化苯甲酰0.1000mg。
准确取1.0、2.5、5.0、7.5、10.0ml过氧化苯甲酰标准溶液置于提取瓶中，以下按2.1.4.1中b)、c)、d)操作。
2.1.5 测定
在2.1.3.3操作条件下，待仪器稳定后分别进样5μl各浓度标准溶液，测定峰高与浓度比较制定标准曲线，然后进样5μl样品溶液，以峰高在标准曲线上求得过氧化苯甲酰含量。
2.1.6 计算
将测得双试试样溶液中过氧化苯甲酰的峰高值进行平均，过氧化苯甲酰的含量按下式计算：
AV
X=──────
m×1000
式中：X──小麦粉中过氧化苯甲酰含量，g/㎏；
A──进样液中过氧化苯甲酰含量，μg/ml；
m──样品质量，g；
V──样品溶液体积，ml；
1000──换算系数。
2.2 紫外分光光度法
2.2.1 原理
采用铁粉与盐酸反应产生原子态氢还原过氧化苯甲酰成苯甲酸，利用紫外分光光度法测定苯甲酸的吸光度，从而判断小麦粉中过氧化苯甲酰的使用量。
2.2.2 试剂(未注明的均为AR级)
2.2.2.1 1%NaHCO3/5%NaCl作溶剂，配制1%NaHCO3
2.2.2.2 乙醚(不含过氧化物)
2.2.2.3 还原铁粉
2.2.2.4 盐酸
2.2.3 仪器
紫外分光光度计
2.2.4 样品的预处理
2.2.4.1 试样预处理
称取10g小麦粉于具塞三角瓶中，分别加入1g还原铁粉，30ml乙醚，振摇，加入2ml盐酸，不时振摇，用少量乙醚冲洗瓶壁，放置12h以上，振摇后沉淀倾滤，再加乙醚于具塞三角瓶中，重复上述操作共三次。
合并乙醚层，各用20ml5%NaCl水溶液洗2次，弃去水相，乙醚层用20ml的1%NaHCO3/5%NaCl溶液提取2次，提取液合并于250ml三角瓶中，加盐酸酸化至PH值1－2，于40℃水浴上摇荡，冷却，用蒸馏水转移至100ml容量瓶中，定容。
2.2.4.2 标准液的预处理
称取于浓硫酸干燥器中放置24h以上的过氧化苯甲酰原粉0.1000g，用丙酮溶解并定容100ml。
移取上述溶液各0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml于具塞瓶中，“加入1g铁粉……”(方法同2.2.4.1)。
2.2.5 测定
在230nm以试剂空白调零，分别测定标准液溶液和试样液的汲光度。从工作曲线上查出试样液的含量。
2.2.6 计算：
A.V
X=───
m
X－小麦粉中过氧化苯甲酰含量，mg/㎏；
A－从工作曲线上查出样品溶液浓度，μg/ml；
V－样品溶液定容体积；
m－样品质量，g；
附录A
(提示的附录)
甲醛合次硫酸氢钠(吊白块)的定性检验
A1 原理
甲醛合次硫酸氢钠在酸性介质中与原子态氢生成H2S使醋酸铅试纸变黑。
A2 试剂
A2.1 盐酸(1：1)
A2.2 醋酸铅试纸
A2.3 锌粒
A3 试验
取小麦粉2g加入20ml水混匀，移入锥形瓶中，向瓶中加入1：1盐酸溶液4ml，再加锌粒迅速在瓶中包一张醋酸铅试纸，放置1h。
若醋酸铅试纸变棕黑色，则样品中含有甲醛合次硫酸氢钠。
附录B
(提示的附录)
小麦粉中掺入荧光增白剂的定性检验
B1 原理
荧光物质在紫外光波长365nm照射下，发银白色荧光。
B2 试验
取少量小麦粉于玻片上，放于波长365nm紫外线分析仪下观察，若产生银白色荧光，则含有荧光增白剂。
福建省质量技术监督局2001-04-20批准2001-06-01实施